荧光定量仪采购指南 [复制链接]

#荧光定量仪#是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应，循环后产物总量的方法。

荧光定量仪的优势

1、六通道同时检测

五个常规激发和检测通道，与大多数荧光染料和探针类型兼容，以实现绝对定量，相对定量，基因分型和其他检测；为实现用户低荧光背景值的简介，对高灵敏度测试的需求使测试更加便捷和专业。

2、多种操作方法

在继承经典的外部计算机一对一控制的基础上，创造性地将远程控制引入到局域网中以及该仪器的独立本地操作模式；内置的10.4英寸触摸屏配备了自主研发的控制软件，实验设置，实验实时监控，仪器设置等操作更加便捷。

3、高效温度控制系统

荧光定量PCR仪基于在块下排列的六个半导体冷却芯片的珀尔帖效应，温度均匀性，准确性，温度上升和下降率得到了明显改善实验周期温度梯度函数的实现省去了以往对退火温度的重复探索，提高了实验效率。

4、科学合理的光学系统

荧光激发光源采用高亮度长寿命LED，荧光检测系统终身免费维护；光学系统位于仪器的顶部，在操作过程中顶部被激发并被扫描，因此无需担心孔中的灰尘。紧凑型光学系统带来的不利影响与6个荧光检测通道集成在一起，实现了多项技术突破；同时，增加恒温控制以确保荧光检测的准确性和稳定性。

5、强大而完善的软件功能

根据不同行业用户的需求，它具有多个功能模块，如绝对定量，相对定量，SNP分析，HRM分析等；自定义报告模板功能突出了精度和专业性；权限管理功能可进一步保护您的实验数据，防止泄漏，并保证数据安全性。

6、贴心的辅助功能

实验操作期间实时存储实验数据；自动断电保护功能，避免因突然异常断电而丢失实验数据和试剂浪费，断电后自动执行完成的实验将同时形成完整的实验数据报告；借助智能故障排除功能，系统可以智能地确定故障类型，并提供维修和故障排除的范围，为以后的设备维护提供了方便。

7、保留全自动功能

可以通过软件控制荧光定量PCR仪以完成样品仓的弹出和关闭，这保留了一个接口，用于在以后的全自动核酸中加载PCR板检测工作站；开放的LIS端口，与当前市场上的主流LIS系统兼容，为样品信息和实验数据的一站式传输和集成做好了技术准备。

荧光定量仪的分类

（1）金属板式实时定量PCR仪：可容纳的样本量大，无需特殊耗材，但温度均一性欠佳，有边缘效应，标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。

（2）离心式实时定量PCR仪：能保障标准曲线和样品之间反应条件的一致性。但可容纳样品量少，有的需用特殊毛细管作样品管，增加了使用成本。

（3）各孔独立控温的定量PCR仪：各孔独立控温，适合多指标快速检测。但是上样不如传统方法方便，而且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。

荧光定量仪的应用

基因表达研究：对β地中海贫血症患者β与γ珠蛋白mRNA水平进行检测，其结果特异性强、定量准确，为了解β地中海贫血的分子病理机制及其临床诊断提供了可靠的检测数据。

转基因研究：利用两种发光探针及适当的循环阈值，扩增一个转移后的基因和一个对照基因，以分析转基因老鼠接合性。该方法为45个转基因动物的同型结合及异质结合提供了明确的鉴定结果。通过实时定量PCR检测，同型结合的异质接合动物交配后其子代中转基因的传递情况符合孟德尔遗传规律。这项技术在转基因动物繁育及基因剂量功能效应实验中将有很大的用途。

单核苷酸多态性及突变分析：实时荧光定量PCR一个诱人的应用前景是用于检测基于两条探针和基因组的不稳定性。基因突变基于两条探针，一条探针横跨突变点，另一条为锚定探针，与无突变位点的靶序列杂交。两条探针用两种不同的发光基团标记。如靶序列中无突变，探针杂交便完全配对，如有突变，则探针与靶序列不完全配对，会降低杂交体得稳定性，从而降低其熔解温度。这样便可对突变和多态性进行分析。

病原体检测：由于实时荧光定量PCR方法可靠性和重复性好，并且操作简便、快速、结果判断客观，目前，人们用此方法对人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、结核杆菌、巨细胞病毒、EB病毒、流感病毒A、流感病毒B等病原体的检测。荧光定量PCR问世后的几年中，积累了大量有关病原体核酸量与感染性疾病发生、发展和预后之间关系的资料，这些研究资料不断丰富，将形成感染性疾病的临床分子诊断标准。

药物疗效考核：利用实时荧光定量PCR技术检测临床样品中与抗药性相关的基因的表达。结果证明，实时荧光定量PCR系统是定量检测抗药基因表达的可靠方法，应用这种技术可以预测化疗将引起的反应。

肿瘤基因检测：肿瘤的本质是细胞内基因发生了变化，是一种多基因异常的疾病，这些异常变化用实时荧光定量PCR方法都可以检测出来。目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性白血病bcr/abl融合基因、肿瘤MDRI基因、白血病WTI基因、肿瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、肿瘤相关的病毒基因等多种基因的表达检测。随着与肿瘤相关的新基因的不断发现。荧光定量PCR技术将会在肿瘤的研究中发挥更大的作用。

荧光定量仪的应用场景

1、仪器的检测通量

2、灵活性

3、多重扩增的能力

4、软件

5、仪器样品孔之间的差异性

6、试剂盒的选择

荧光定量仪的使用注意事项

1、仪器的表面应定期用软布加少量清水擦洗，清洗后将仪器擦干。若有试剂泄漏在仪器表面，应用软布加70%酒精擦拭干净。

2、反应孔沾染灰尘或杂质后，会影响PCR扩增和荧光检测，因此要定期清洁，一般3个月一次，可用吹气球轻轻吹拭。

3、为了防止灰尘进入反应孔，仪器不使用时，必须关闭滑盖。

4、若有试剂进入样本孔内，应用无尘软布加70%酒精擦拭干净。

5、不要频繁开关仪器，两次开关间隔时间不得低于30秒。

6、实验结束后不要立即关闭电源，保持待机状态10分钟后，待模块温度降至室温再关闭电源。

7、请使用原厂商提供的电源线和通讯线。

8、不要在样品板或8联管侧壁上用记号笔做记号，顶盖可以标记。